来源:leyu乐鱼全站App下载 发布时间:2024-04-01 00:40:42
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准确性:规范品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,不小于 0.9600试剂盒选用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。往预先包被相关目标的抗体的包被微孔中,顺次参加标本、规范品、HRP符号的检测抗体,通过温育并 洗刷。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的效果下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的相关目标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),核算样品浓度。1. 血清:运用不含热原和内毒素的试管,操作的流程中防止任何细胞影响,搜集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞敏捷小心肠别离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。4. 安排匀浆:将安排参加适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL1. 试剂盒保存在 2-8℃,运用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗刷液会有结晶,这归于正常现象,水浴加热使结晶彻底溶解后再运用。3. 浓度为 0 的规范品可视为阴性对照或许空白;依照说明书操作时样本现已稀释 5 倍,终究成果乘以5才是样本终究浓度。7. 20×洗刷缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗刷缓冲液加 19 份的蒸馏水。1.手艺洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗刷液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。2.主动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩下板条用自封袋密封放回 4℃。2. 设置规范品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;规范品孔各加不同浓度的规范品 50μL;4. 随后规范品孔和样本孔中(空白孔不加)参加辣根过氧化物酶(HRP)符号的检测抗体 50μL,用封板膜封住反响孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗刷液,静置 1min,甩去洗刷液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。6. 全部孔参加底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。7. 全部孔参加停止液 50μL,15min 内,在 450nm 波利益测定各孔的 OD 值。制作规范曲线:在Excel作业表中,以规范品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,制作出规范品线性回归曲线,按曲线方程核算各样本浓度值。试剂盒仅供研讨运用,不得用于临床实验或生物体实验,不然所发生的全部成果,由实验者承当, 本公司概不负责。严厉依照说明书操作,不同批号不行交流运用,实验者违背说明书操作,成果由实验者承当。本试剂盒选用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。往预先包被捕获抗体的包被微孔中,顺次参加标本、规范品、HRP符号的检测抗体,通过温育并 洗刷。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的效果下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),核算样品浓度。
5. 保存:假如样本搜集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,防止重复冻融,在室温下解 冻并保证样品均匀地充沛冻结。
8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3按捺辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
凡在本公司购买ELISA试剂盒,可提供免费待测服务,视样本数量而定出成果时刻,一般一周内出检测成果!
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